Антицитокиновая терапия бронхиальной астмы
Содержание статьи:
Становится все более очевидной чрезвычайная гетерогенность бронхиальной астмы (БА). Более 30 лет назад, в 1977 г., мы указывали на наличие у больных БА семи клинико-патогенетических вариантов течения БА, названных в последующем фенотипами: инфекционнозависимого, атопического, гормонального, нервно-психического, аутоиммунного, выраженного адренергического дисбаланса и первично измененной реактивности бронхов.
Для каждого из этих вариантов были разработаны методы индивидуальной диагностики и терапии, результаты их апробации неоднократно публиковались. В последующем формулировка "первично измененная реактивность бронхов" была заменена на представления о бронхиальной астме физического усилия, дизовариальном и аспириновом клинико-патогенетических вариантах (фенотипах) бронхиальной астмы, совершенствовались методы индивидуальной диагностики и терапии, и повышалась их эффективность.
Наиболее эффективными для лечения бронхиальной астмы с полным на то основанием признаются ингаляционные кортикостероиды (ИГКС). Однако у 5-10% больных БА комплексное лечение даже с включением ИГКС неэффективно. Хотя процент больных, резистентных к применению ИГКС, невелик, но на долю этих больных приходится 50% от общей стоимости лечения больных бронхиальной астмой.
Недостаточная эффективность лечения существующими методами части больных БА служит поводом для изучения фенотипов и формирующих их эндотипов бронхиальной астмы. Знание механизмов (эндотипов), формирующих фенотипы, создает перспективы для разработки новых методов лечения, учитывающих индивидуальные особенности БА у данного больного. Кластерный анализ двух больших европейских когорт выявил два фенотипа. Первый касается больных с ранним началом аллергической бронхиальной астмы, а второй включает преимущественно женщин с поздним началом заболевания, без атопии, с высоким индексом массы тела.
Для классификации эндотипов у больных БА после кластерного анализа были выбраны 7 параметров: клинические характеристики, биомаркеры, физиология легких, генетика, гистопатология, эпидемиология и реакция на лечение. На основе этих параметров были предложены следующие эндотипы бронхиальной астмы:
- аспиринчувствительная;
- аллергическая астма;
- астма у детей в дошкольном возрасте с хрипами;
- тяжело протекающая астма с гиперэозинофилией и поздним началом;
- астма у любителей беговых лыж.
- эозинофильного воспаления;
- аллергической сенсибилизации с наличием антиген-специфического IgE и гиперреактивностью;
- ремоделирования бронхов.
В качестве маркера, определяющего характер воспаления у больных БА, была использована цитологическая характеристика индуцированной мокроты. Воспалительный процесс органов дыхания у больных БА неоднороден, а диагностика различных воспалительных фенотипов БА дает возможность определить патогенетический вариант БА у данного больного и открывает путь для персонализированной терапии. Simpson и соавторы (2006) разработали четыре воспалительных фенотипа бронхиальной астмы: нейтрофильный, эозинофильный, гранулоцитарный и малогранулоцитарный, возможны сочетания фенотипов. Мы считаем, что к этим клеточным фенотипам нужно добавить эпителиальный и макрофагальный фенотипы.
В настоящее время описан 161 биомаркер, свидетельствующий о наличии, выраженности и характере воспаления дыхательных путей при аллергических заболеваниях. В качестве таких маркеров в последнее время используются цитокины (ЦК), которые участвуют в осуществлении иммунологических и других реакций и входят в число механизмов, формирующих эндотипы различных фенотипов БА.
Роль цитокинов
Цитокины (ЦК) - небольшие белки, осуществляющие сигнализацию между клетками и являющиеся группой гуморальных факторов системы как врожденного, так и адаптивного иммунитета. Связь между клетками, выполняемая цитокинами, необходима для осуществления различных функций (рост, хемоаттракция, клеточная пролиферация и дифференцировка и др.). Сочетанность и избыточность действия цитокинов (ЦК) и плейотропия затрудняют оценку их роли в патогенезе различных патологических состояний. Как и другие медиаторы воспаления, цитокины действуют на рецепторы мембран клеток с высокой степенью сродства.
Цитокины по механизму действия могут быть разделены на три основные группы:
- провоспалительные, участвующие в формировании воспалительного ответа (интерлейкины (ИЛ)-2, -6, -8, фактор некроза опухоли (ФНО)-альфа, интерферон-гамма (ГИН) и др.);
- противовоспалительные, уменьшающие развитие воспаления (интерлейкины 4, 10, ТGFB и др.);
- регуляторы клеточного и гуморального иммунитета (естественного или специфического), имеющие специфические функции (противовирусные, цитотоксические и др.).
- цитокины участвующие в цитотоксических (противовирусных и противораковых) гуморальных и клеточных реакциях (Th1 и Th17);
- цитокины участвующие в аллергических реакциях (Th2);
- цитокины участвующие в иммуносупрессивных, регуляторных реакциях (Treg).
Суммарный итог опубликованных в литературе данных о роли цитокинов позволяет выделить основные позиции, характеризующие участие цитокинов в иммунных реакциях: способствуют распознаванию антигенов, содействуют экспрессии на клетках иммунной системы молекул адгезии, влияют на миграцию иммуноцитов, активируют моноциты и макрофаги, являются кофакторами антигенов при активации и пролиферации лимфоцитов.
Известны вещества, которые оказывают подавляющее действие на цитокины:
- ингибиторы синтеза цитокинов - глюкокортикостероиды, циклоспорин А, такролимус, микрофеналат;
- гуманизированные ингибирующие антитела к цитокинам и их рецепторам;
- растворимые частицы, блокирующие рецепторы цитокинов;
- антагонисты и лекарственные средства, блокирующие процесс трансдукции цитокинов.
Созревание, мобилизация и выживание эозинофилов в дыхательных путях определяется ИЛ-3, GM-CSF, но особенно ИЛ-5, который играет ключевую роль в посредничестве в дыхательных путях эозинофилов с другими клетками и формировании эозинофильного воспаления у больных бронхиальной астмой. ИЛ-5, ИЛ-3, GM-CSF содействуют развитию эозинофилов из СD34 гемопоэтических клеток-предшественников, хотя только ИЛ-5 оказывает специфическое влияние на эозинофилы в процессе развития и дифференцировки.
Эозинофилы участвуют в генерации цитокинов:
- эозинофилы активируют Th2-клетки, которые секретируют цитокины;
- эозинофилы вызывают секрецию цитокинов Th2-клетками.
Механизмы эозинофильного варианта бронхиальной астмы включают стимуляцию Th2 аллергенами, что сопровождается высвобождением цитокинов (ИЛ-4, -5, -9, -13). В биоптатах слизистой оболочки бронхов этих больных выявляется инфильтрация эозинофилами, активированными тучными клетками и Th2-клетками.
Взаимодействие цитокинов с другими клетками
Тучные клетки являются основным источником связанных с аллергией цитокинов (ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-6, ФНО). Тучные клетки оснащены рецепторами для взаимодействия с цитокинами (ИЛ-3R, ИЛ-4R, ИЛ-5R, ИЛ-9R, ИЛ-10R и др.).
У больных с нейтрофильной бронхиальной астмой выражена активность ИЛ-17. Тяжесть заболевания коррелирует с уровнем ИЛ-17 в сыворотке крови. ИЛ-8 оказывает влияние на функционирование нейтрофилов, a ИЛ-17 привлекает нейтрофилы в зону воспаления и активной инфекции.
По способности продуцировать цитокини лимфоциты разделены на три группы: 1-я группа - производство INF-гамма, 2-я группа - производство ИЛ-5 и ИЛ-13, 3-я группа - ИЛ-17 и ИЛ-22. В связи с участием ИЛ-5 в формировании эозинофильного варианта бронхиальной астмы этот цитокин получил название "эозинофильный колониестимулирующий фактор".
ИЛ-17 действует на эпителий дыхательных путей, стимулируя секрецию большого числа биологически активных веществ и в их числе цитокины ИЛ-4, ИЛ-5. Кроме того, ИЛ-17 является активатором эндотелиальных клеток, приводя к миграции нейтрофилов в зону воспаления.
Связь цитокинов с клетками обеспечивает выполнение их основной функции - формирование взаимодействия между клетками в процессе осуществления иммунологических и других реакций. Эта связь цитокинов с клетками может быть наглядно проиллюстрирована на примере реакции иммунной системы на воздействие антигенного стимула. Антиген через антиген-представляющие клетки воздействует на Th0-клетки, приводя их к дифференциации в Th2, в этом событии принимает участие ИЛ-4. Затем с участием ИЛ-4, ИЛ-5 и ИЛ-13 происходит активация В-клеток с образованием аллерген-специфических IgE, которые фиксируются на поверхности тучных клеток. При стимуляции антигеном тучные клетки секретируют гистамин, простагландины и лейкотриены, что приводит к бронхоспазму, гиперсекреции и отеку слизистых дыхательных путей. Одновременно Th2-клетки через воздействие ИЛ-5 стимулируют эозинофилы на образование лейкотриенов и активных форм кислорода. Все это в совокупности в условиях нормального функционирования направлено на элиминацию антигена, а у больных приводит к обструкции и формированию воспаления.
Периостин
Первая публикация о периостине была сделана в 1993 г., и первоначальное название этого белка было "остеобластов-специфический фактор 2". Периостин - внеклеточный многофункциональный белок, который у человека кодируется геном POSTIN и опосредует активацию клеток путем связывания с рецепторами.
Внимание к периостину было привлечено в ситуациях, связанных с переломами костей. Последующие исследования показали, что периостин экспрессируется многими органами взрослого человека и тканями плода, в том числе плацентой, сердцем, легкими, щитовидной железой, надпочечниками, эпителиальными клетками, фибробластами, эозинофилами. Основными источниками периостина у больных бронхиальной астмой являются эпителиальные, эндотелиальные клетки и фибробласты. Экспрессия периостина эпителиальными клетками дыхательных путей регулируется Th2 с участием ИЛ-4 и ИЛ-13.
С повышенной экспрессией периостина связывают развитие различных дефектов органов и заболеваний костей, зубов, клапанов сердца, развитие различных опухолей, нарушение рубцевания после перенесенного инфаркта миокарда, анкилозирующий спондилоартрит, интерстициальную пневмонию, воспаление почек и фиброз, рак, эзофагит.
Периостин экспрессируется более активно у пациентов, которые находятся в условиях, связанных с повышенным делением клеток и активного ангиогенеза. Отмечается связь высокого уровня периостина с формированием хронического воспаления и ремоделированием тканей.
Установлены связи уровня периостина с механизмами патогенеза бронхиальной астмы: формированием фенотипа Th2, повышенной экспрессией медиаторов воспаления и гиперэозинофилией. Аллергены стимулируют секрецию иммунными клетками ИЛ-4 и ИЛ-5, тем самым стимулируя эозинофилы секретировать периостин и мобилизуя эозинофилы в зону аллергического воспаления. Как в эксперименте, так и в клинических исследованиях больных бронхиальной астмой было установлено, что периостин мобилизует эозинофилы в органы дыхания, повышает их адгезию, что происходит с участием ИЛ-5, ИЛ-13 и GM-CSF.
Стимулированная периостином Th2 система воспаления и связанная с этим секреция иммунными клетками ИЛ-4 и ИЛ-13 активируют фибробласты и как следствие формируют развитие у больных бронхиальной астмой субэпителиального фиброза.
Предполагают, что периостин играет важную роль в формировании эозинофильного фенотипа бронхиальной астмы и в тяжелом, злокачественном ее течении.
Уровни периостина в сыворотке крови у больных бронхиальной астмой были значительно выше, чем у здоровых доноров. Установлена связь между высоким уровнем периостина в сыворотке крови, поздним началом БА, гиперэозинофилией и сочетанием БА с синуситом. У пациентов с бронхиальной астмой и наличием непереносимости аспирина выявлен высокий уровень периостина в сыворотке крови. У этих больных констатирован эозинофильный фенотип БА, полипозный синусит, низкая эффективность лечения ИГКС и тяжелое течение БА. У больных с хроническим риносинуситом и полипами в носу уровень периостина в сыворотке крови был значительно выше, чем у больных с риносинуситом, но без полипов. Сывороточный уровень периостина у больных с атопическим дерматитом был значительно выше, чем у больных с псориазом и здоровых контрольной группы.
Эозинофильный фенотип у больных бронхиальной астмой с высоким уровнем периостина сыворотки крови сочетается с экспрессией ИЛ-5 и ИЛ-13, высоким уровнем сывороточного IgE, системной и легочной эозинофилией, увеличением толщины базальной мембраны и снижением чувствительности к ингаляционным глюкокортикостероидам (ИГКС).
Значимые корреляции уровня периостина с различными характеристиками течения бронхиальной астмы служат поводом для предложений использовать этот белок в качестве маркера особенностей течения болезни: выраженности 2-го типа иммунного ответа, для выявления больных с высокой активностью ИЛ-13, прогноза эффективности ИГКС терапии.
Уровни периостина в сыворотке крови у больных БА слабо связаны с выраженностью обструкции бронхов, и этот показатель не может быть значимым маркером тяжести течения БА. Высказываются мнения, что периостин может стать терапевтической мишенью для лечения бронхиальной астмы.
С момента появления первой публикации о периостине прошло 24 года, и, как можно судить по литературным данным, периостин активно и многосторонне изучается, но результаты исследований носят иногда противоположный характер. По данным одного исследования, содержание периостина в сыворотке крови и эозинофилия тесно связаны. В другом исследовании получены результаты, в соответствии с которыми уровни периостина в сыворотке крови не дифференцируют эозинофильный и неэозинофильный фенотипы течения бронхиальной астмы.
Антицитокиновая терапия
Антицитокиновая терапия бронхиальной астмы основана на применении препаратов антагонистов цитокинов, обладающих провоспалительным действием. Число научных публикаций по астме превышает 1 500 000 статей, причем почти 6% из них содержат отчеты о результатах рандомизированных контролируемых исследований, связанных с лечением БА. Однако, несмотря на эти исследования, варианты лечения астмы остаются ограниченными, а среди лекарственных препаратов доминируют стероиды. Открытие различных фенотипов воспаления у больных бронхиальной астмой и связанного с этим молекулярного фенотипирования благодаря новым технологиям в области молекулярной биологии и иммуногенетики позволили синтезировать специфические моноклональные, в том числе антицитокиновые антитела. Анти-ИЛ моноклональные антитела должны уменьшать воспаление дыхательных путей и предотвращать активацию эозинофилов.
Препараты для лечения цитокинами
Меполизумаб (mepolizumab) - гуманизированное моноклональное антитело, блокирующее ИЛ-5, который мобилизирует из костного мозга и активирует эозинофилы. Ortega и соавторы (2014) применили меполизумаб для лечения 539 больных бронхиальной астмой. По сравнению с плацебо частота обострений болезни оказалась ниже на 47%. Положительный эффект при лечении меполизумабом как при внутривенном, так и при подкожном введении был достигнут у 50% больных. Bel и соавторы (2014) лечили меполизумабом 135 больных БА. Средний процент снижения дозы принимаемых через рот глюкокортикоидов составил 50% у больных основной группы. В группе плацебо снижения дозы лекарства не было. В 2015 г. FDA США и Европейский EMA одобрили меполизумаб в качестве поддерживающей терапии тяжело протекающей эозинофильной бронхиальной астмы у взрослых.
Реслизумаб (reslizumab) - гуманизированное моноклональное антитело к ИЛ-5. Castro и соавторы (2011) лечили реслизумабом 53 взрослых больных с тяжело протекающей эозинофильной бронхиальной астмой. Было отмечено улучшение клинического состояния, уменьшение содержания эозинофилов в крови и мокроте и увеличение ОФВ1. Лечение оказалось наиболее эффективным у больных с полипозом полости носа.
Бенрализумаб (benralizumab) - гуманизированное моноклональное антитело к рецептору ИЛ-5. Castro и соавторы (2014) лечили бенрализумабом 385 больных эозинофильной неконтролируемой астмой. Разовая доза бенрализумаба снижала число эозинофилов в крови и уменьшала число обострений.
Лебрикизумаб (lebrikizumab) - гуманизированное моноклональное антитело, блокирующее ИЛ-13, который индуцирует секрецию периостина эпителиальными клетками бронхов, стимулирует синтез IgE, фиброз бронхов и гиперчувствительность дыхательных путей. Corren и соавторы (2011) лечили лебрикизумабом 219 больных бронхиальной астмой. Была отмечена несущественная тенденция к уменьшению тяжести обострений по сравнению с группой плацебо. Эффективность лечения была выше у больных с высоким уровнем периостина в сыворотке крови. Noonan и соавторы (2013) лечили лебрикизумабом 210 больных астмой. Анализ эффективности лечения не выявил существенных изменений клинического течения и ОФВ1 у лечившихся лебрикизумабом больных БА по сравнению с группой плацебо. Maselli и соавторы (2015) лечили лебрикизумабом больных БА. Было отмечено уменьшение частоты обострений у больных, лечившихся лебрикизумабом, на 60% по сравнению с группой плацебо. Снижение уровней FeNo (оксида азота) в процессе лечения было более выраженным у больных с высоким уровнем периостина в сыворотке крови (34 и 4% соответственно). У пациентов с высоким уровнем FeNo в процессе лечения отмечалось более значительное улучшение функции легких и меньшее число обострений бронхиальной астмы.
Дупилумаб (dupilumab) - гуманизированное моноклональное антитело к рецептору ИЛ-4, блокирующее эффекты ИЛ-4 и ИЛ-13. Эти цитокины имеют повышенную активность у больных бронхиальной астмой с эозинофилией и другими признаками повышенной активности Th2 системы иммунитета. Wenzel и соавторы (2013) лечили дупилумабом 104 больных астмой, у которых по сравнению с группой плацебо было отмечено меньшее число обострений, вызванных отменой лекарств (р≤0,001) и увеличение ОФВ1 (р≤0,001).
Даклизумаб (daclizumab) - гуманизированное моноклональное антитело к ИЛ-2, ингибирующее пролиферацию клеток и либерацию клетками цитокинов. Busse и соавторы (2008) лечили даклизумабом 115 взрослых больных с тяжелым течением астмы. Было констатировано лишь небольшое улучшение функции легких и контроля за течением болезни.
Анрукинзумаб (anrucizumab) - гуманизированное моноклональное антитело к ИЛ-13. DeBoever с соавторами (2014) лечили анрукинзумабом 237 больных с тяжело протекающей астмой, получавших максимальные дозы ИГКС. Было отмечено отсутствие положительной динамики независимо от содержания эозинофилов и уровней IgE.
Тралокинумаб (tralokinumab) - гуманизированное моноклональное антитело к ИЛ-13. May c соавторы (2012) лечили тралокинумабом 194 больных бронхиальной астмой с течением болезни средней тяжести и тяжелым. Было отмечено умеренное улучшение функции легких и уменьшение применения адреномиметиков.
Доступные для ознакомления публикации о лечении больных антицитокиновыми препаратами позволяют сделать следующие выводы.
- Эффективность лечения этими препаратами невысокая, и если достигнут клинический эффект, то он не превышает 50-60%.
- В отдельных исследованиях отмечен более высокий эффект при наличии эозинофилии крови, эозинофилов в мокроте, повышенного содержания оксида азота в выдыхаемом воздухе.
- Нет сведений о ятрогенном влиянии этих препаратов и об их противопоказанности.
- Перед началом лечения и в процессе его проведения не определялись уровни соответствующих цитокинов.
- Перед началом лечения и в процессе его проведения не определялись уровни соответствующих цитокинов.
- какие сочетания цитокинов с учетом их уровней имеются у разных групп обследованных;
- насколько статистически достоверны возможные связи между цитокинами, и если такие связи имеются, то какова их смысловая трактовка;
- каково участие цитокинов в процессах сенсибилизации;
- могут ли быть результаты исследования цитокинов использованы для клинической диагностики и назначения лекарственной терапии.
Задачи исследования
- Установить уровни цитокинов у разных групп исследованных (для больных - в фазу обострения болезни).
- Определить частоту (в %) сочетания разных цитокинов с учетом их уровня и числа.
- Рассмотреть возможные комбинации сочетания цитокинов с учетом их уровня.
- Проанализировать наличие и достоверность связей между цитокинами для всего массива данных и для каждой группы исследованных.
- Изучить участие цитокинов в сенсибилизации бактериальными и атопическими аллергенами с учетом наличия и отсутствия аллергических заболеваний.
Материалы и методы
В исследование включены 210 человек: 32 больных бронхиальной астмой легкого течения (БАЛТ) - 1-я группа, 39 больных бронхиальной астмой средней тяжести течения (БАСТ) - 2-я группа, 39 больных бронхиальной астмой средней тяжести течения в сочетании с хронической обструктивной болезнью легких (БАСТ+ХОБЛ) - 3-я группа, 38 больных хронической обструктивной болезнью легких (ХОБЛ) - 4-я группа, 17 больных внебольничной пневмонией (ВП) - 5-я группа, 25 больных гипертонической болезнью (ГБ) и ишемической болезнью сердца (ИБС) - 6-я группа, 20 здоровых - 7-я группа. Данные по возрасту и полу исследованных представлены в таблице 1.
Проводились общеклиническое, лабораторное и инструментальное исследования. Аллерген-специфические IgE и цитокины в сыворотке крови определялись методом твердофазного неконкурентного непрямого иммуноферментного анализа. Проведено определение аллерген-специфического IgE к аллергенам клеща, бытовой пыли, сборным аллергенам пыльцы луговых трав, деревьев, сорных трав и цветов, Strept. рneumon., Haemophil. influenzae, Neisseria рerflav.
Для суммарной оценки инфекционной сенсибилизации был выведен инфекционный потенциал (ИНФП), а для суммарной оценки атопической сенсибилизации - атопический потенциал (АТП) для каждого исследованного. Инфекционный потенциал: аллерген-специфический IgE к Strept. pneumon. + IgE к Haemoph. influenza + IgE к Neiss. perflavae (КЕ/л). Атопический потенциал: аллерген-специфический IgE к клещу + аллерген-специфический IgE к пыли + аллерген-специфический IgE к луговым травам + аллерген-специфический IgE к пыльце деревьев + аллерген-специфический IgE к сорным травам + аллерген-специфический IgE к цветам (классы).
Для оценки выраженности каждого показателя у всех обследованных определялся уровень, к которому относится данный показатель: низкому, среднему и высокому. Уровни рассчитывались при анализе гистограмм каждого показателя. Границы уровней исследованных показателей приводятся в таблице 2.
Для статистического анализа данных использовались программы Statistica 6.1 StatSoft, Inc. При интерпретации результатов критической величиной уровня значимости считали 0,05. В качестве описательных статистик для количественных признаков использовались среднее и среднеквадратическое отклонение (М±s). Также использовался t-критерий Стъюдента и корреляционный анализ по Пирсону.
Результаты и обсуждение
1. Уровни цитокинов у всех групп исследованных представлены в таблице 3. Имеются разные уровни цитокинов у обследованных всех групп: диапазон встречаемости частоты низкого уровня от 4,3 до 61,5%, а диапазон встречаемости частоты высокого уровня от 11,8 до 75% исследованных. Разные уровни цитокинов имеются у исследованных всех групп, включая больных ИБС, ГБ и здоровых.
2. Частота встречаемости (в %) сочетания нескольких цитокинов одного уровня у каждой группы исследованных представлена на рисунке 1. Частота «0» означает, что у данной группы исследованных отсутствуют цитокины данного уровня. У исследованных всех групп частоты сочетания нескольких цитокинов одного уровня существенно не отличаются. В таблице 4 представлена частота встречаемости сочетания нескольких цитокинов высокого уровня у одного исследованного. У 3,1-39,1% исследованных имелись одновременно высокие уровни нескольких цитокинов независимо от группы исследованных, в том числе и у больных ГБ, ИБС и здоровых.
3. Частота встречаемости числа цитокинов высокого уровня представлена в таблице 4. У 19,4-51,6% обследованных всех групп отсутствовали цитокины высокого уровня, у 16,1-27,8% имелся один цитокин высокого уровня. Сочетания разного числа цитокинов высокого уровня отмечены у обследованных всех групп.
4. Для рассмотрения имеющихся у обследованных комбинаций двух цитокинов разных уровней была использована матрица (табл. 5), включающая 9 клеток, в которых фиксируется процентное содержание девяти комбинаций двух цитокинов у данной группы обследованных.
Например, приведенная на рисунке 2 матрица приготовлена для выявления у какой-либо группы обследованных девяти имеющихся сочетаний уровней ИЛ-4 и ИЛ-10. В первой ячейке приведен процент обследованных данной группы с низкими уровнями ИЛ-4 и ИЛ-10, а в девятой ячейке процент обследованных данной группы с высокими уровнями ИЛ-4 и ИЛ-10. В остальных 7 ячейках будут приведены проценты обследованных с соответствующими уровнями ИЛ-4 и ИЛ-10. На рисунке 2 приведена графическая демонстрация сочетаний ИЛ-4 и ИЛ-10 у обследованных разных групп.
Таким образом, была получена частота встречаемости каждого из 9 вариантов сочетания уровней двух сопоставляемых цитокинов для каждой группы обследованных. Для того чтобы установить, отличается ли полученный по девятиклеточной матрице диапазон частот уровней двух сопоставляемых цитокинов у разных групп обследованных, и не имея возможности привести в статье весь полученный при этом фактический материал, мы приводим диапазон частот (минимальная и максимальная частота в %), сопоставляемых цитокинов для каждой группы обследованных (табл. 6). Полученные при этом данные свидетельствуют о том, что диапазон частот величин исследованных цитокинов существенно не отличается у групп обследованных, в том числе у больных и здоровых.
5. Для физиологической и клинической трактовки многообразных связей между исследованными цитокинами нужно узнать, имеется ли между ними статистически достоверная связь. Были исследованы статистически связи между парами цитокинов по всему массиву данных и для каждой группы обследованных. Результаты исследования связей по всему массиву данных представлены в таблице 7.
Взаимодействие ИЛ-4 с ИЛ-10, ИЛ-17, ГИН; ИЛ-6 с ФНО; ИЛ-10 с ИЛ-17 и ГИН; ИЛ-17 c ГИН и ФНО имеет выраженную статистически достоверную связь. Какие функции этих цитокинов формируют эти достоверные связи, нам неизвестно, но, несомненно, эти связи имеют отношение к функционированию цитокинов как в норме, так и в условиях патологии. Результаты исследования связей между цитокинами у различных групп обследованных представлены в таблице 8. У 25% пар сопоставлявшихся цитокинов взаимодействие между ними оказалось статистически значимым.
6. Для оценки участия цитокинов в сенсибилизации бактериальными и атопическими аллергенами было проведено статистическое сопоставление показателей, характеризующих ИНФП и АТП сенсибилизацию с разным уровнем каждого из исследованных цитокинов у лиц без аллергических заболеваний (ХОБЛ + ВП + ГБ и ИБС + здоровые) с больными, у которых имеются аллергические заболевания (БАЛТ + БАСТ + БАСТ в сочетании с ХОБЛ) (табл. 9, рис. 3, 4).
Оказалось что: 1. имеется достоверное отличие ИНФП у обследованных без аллергии от ИНФП у обследованных с аллергией при наличии цитокинов преимущественно высокого уровня (кроме ФНО); 2. достоверности различия показателя, характеризующего АТП у обследованных групп, ни при одном уровне цитокинов (кроме высокого уровня ИЛ-4) получено не было; 3. достоверной связи ФНО с различиями ИНФП и АТП у обследованных не было установлено; 4. более высокие уровни ИНФП и АТП у обследованных без аллергии еще раз подтверждают высказывавшееся ранее мнение о том, что у лиц без аллергии специфические антитела класса IgE к инфекционным и неинфекционным аллергенам выполняют защитную роль.
Выводы
- Уровни цитокинов имеют большой диапазон у обследованных всех групп, включая группу сравнения (ГБ и ИБС) и здоровых.
- У обследованных всех групп частоты сочетания нескольких цитокинов одного уровня существенно не отличаются. У 3,1-39,1% обследованных имелись одновременно высокие уровни нескольких цитокинов независимо от группы обследованных, в том числе и у больных ГБ, ИБС и здоровых.
- Диапазон частот сочетаний исследованных цитокинов разного уровня существенно не отличатся у групп обследованных, в том числе у больных ГБ, ИБС и здоровых.
- Имеется выраженная статистически достоверная связь между цитокинами по всему массиву обследованных. Достоверные связи между цитокинами для отдельных групп обследованных отмечены у около 25% сопоставлявшихся пар цитокинов для каждой группы обследованных.
- Имеется достоверное отличие выраженности ИНФП у обследованных без аллергии от выраженности ИНФП у обследованных с аллергией при наличии цитокинов преимущественно высокого уровня (кроме ФНО), что может рассматриваться как еще один механизм патогенеза сенсибилизации и аллергии.
- Результаты изучения уровней цитокинов, сочетаний цитокинов, того, что можно назвать цитокиновым профилем, позволяют считать, что уровни цитокинов, сочетания цитокинов различных уровней не могут быть использованы для целей клинической диагностики - нозологической диагностики, оценки тяжести течения заболевания и выбора индивидуальной терапии, включая антицитокиновые препараты.
( 0 ) Комментарии